Kurzfassung

Im Rahmen unserer Arbeiten zur Struktur-Funktionsbeziehung in Proteinen untersuchen wir seit einiger Zeit auch die an der Proteinfaltung beteiligten Chaperone mit Hilfe der ESR-Spektroskopie unter Einsatz spinmarkierter Cofaktoren und Substrate (siehe Projekt Vogel). Insbesondere sind dies die Hitzeschockproteine DnaK (Hsp 70) und das Cochaperon GrpE sowie das GroEL/GroES-System, das wir in E. coli exprimieren. Seit kurzem untersuchen wir auch die Wechselwirkung von secB mit seinen Protein-...Im Rahmen unserer Arbeiten zur Struktur-Funktionsbeziehung in Proteinen untersuchen wir seit einiger Zeit auch die an der Proteinfaltung beteiligten Chaperone mit Hilfe der ESR-Spektroskopie unter Einsatz spinmarkierter Cofaktoren und Substrate (siehe Projekt Vogel). Insbesondere sind dies die Hitzeschockproteine DnaK (Hsp 70) und das Cochaperon GrpE sowie das GroEL/GroES-System, das wir in E. coli exprimieren. Seit kurzem untersuchen wir auch die Wechselwirkung von secB mit seinen Protein- und Peptid-Substraten. Diese Systeme sollen jetzt genutzt werden, um auch andere schwer zu faltende Proteine, die z.B. in E. coli als 'inclusion bodies' anfallen, gegebenenfalls durch Coexpression nativ zu gewinnen. Hier werden wir uns allerdings primär mit Proteinen und ihren Mutanten beschäftigen, deren Expression für unsere Arbeiten zur antigenspezifischen Immunsuppression wichtig ist (siehe Projekt 4). Hierzu zählen die a-Untereinheit des Acetylcholin-Rezeptors und seiner extrazellulären Domäne. Aber auch im Rahmen der Projekte 1 und 2 müssen ständig Mutanten exprimiert werden, deren Faltung besonders im Fall der D-3-Hydroxybutyratdehydrogenase problematisch ist. Wir erhoffen uns so langfristig allgemeine Prinzipien für den Einsatz von Chaperoninen bei der Rückfaltung gentechnisch gewonnener Proteine ermitteln zu können.» weiterlesen» einklappen