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Vergleich des EGFR-Rezeptorstatus mit Hilfe der semiquantitativen PCR nach Entparaffinisierung zwischen metastasierten und nicht metastasierten kolorektalen Karzinomen

Laufzeit: 01.01.2006 - 31.12.2007

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Kurzfassung


Während die molekulare Karzinogenese des Kolonkarzinoms zunehmend aufgeklärt ist, ist die Pathophysiologie der Tumorinvasion und Metastasierung noch unverstanden. Chemokinrezeptoren und die Rezeptoren der EGF- und VEGF-Familien beeinflussen die Interaktion mit dem benachbarten Gewebe. Der Epidermal Growth Faktor Rezeptor 1 (EGFR-1) vermittelt über intrazelluläre Signale Proliferation, Apoptosehemmung und Angiogenese von Tumorzellen. Ziel der Studie ist daher, mit Hilfe der Light cycler PCR...Während die molekulare Karzinogenese des Kolonkarzinoms zunehmend aufgeklärt ist, ist die Pathophysiologie der Tumorinvasion und Metastasierung noch unverstanden. Chemokinrezeptoren und die Rezeptoren der EGF- und VEGF-Familien beeinflussen die Interaktion mit dem benachbarten Gewebe. Der Epidermal Growth Faktor Rezeptor 1 (EGFR-1) vermittelt über intrazelluläre Signale Proliferation, Apoptosehemmung und Angiogenese von Tumorzellen. Ziel der Studie ist daher, mit Hilfe der Light cycler PCR quantitative Aussagen zur EGFR-Expression zu treffen und so Unterschiede zwischen metastasierten und nicht metastasierten Kolonkarzinomen zu untersuchen.
Es werden n=270 Paraffinblöcke von Kolonkarzinompatienten im Stadium UICC III/IV und Stadium I/II nach dem RNeasy FFPE Protokoll (Quiagen®) entparaffinisiert und RNA erfolgreich isoliert. Die semiquantitative Analyse von EGFR erfolgte in der real time PCR (Light cycler TM , Roche Diagnostics, Indianapolis) zum internen Referenzgen (GPDH). Die Effizienz der PCR Reaktion beträgt 2, der Expressionsvergleich wird für alle Proben errechnet werden.
Es konnte in früheren Arbeiten gezeigt werden, dass der EGFR Nachweis mittels PCR gegenüber der IHC sensitiver ist.
Möglicherweise kann der Nachweis von EGFR durch die PCR aus Paraffinblöcken mit den klinischen Verläufen besser korrelieren, als was bisher die IHC belegte.
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Beteiligte Einrichtungen